کلونینگ و بیان پروتئین فاکتور رشد جفتی-۱ انسانی (hplgf-۱) در سیستم بیانی rosetta e.coli

نویسندگان

نرگس اربابی

narges arbabi islamic azad university, science and research campus, tehran, iranدانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران مهدی بهدانی

mehdi behdani , biotechnology research center, pasteur institute of iran, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران مجید گل کار

majid golkar , pasteur institute of iran, tehran, iranانستیتو پاستور ایران سیدحمید آقایی بختیاری

seyed hamid aghaee bakhtiari , pasteur institute of iran, tehran, iranمرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران حسین خان احمدشهرضا

چکیده

سابقه و هدف: آنژیوژنزیس یا شکل گیری عروق خونی جدید در شرایط فیزیولوژیک و پاتولوژیک مهم ترین عامل رشد و تکثیر سلول ها است. پروتئین plgfیا فاکتور رشد جفتی یکی از مهم ترین پروتئین ها در تحریک آنژیوژنزیس است. در این پژوهش، ژن plgf-1 انسانی از بافت جفت جدا شده و پروتئین مورد نظر در سیستم باکتریایی بیان شد. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ناحیه کد کننده ژن plgf-1 از بافت جفت انسان توسط پرایمرهای اختصاصی تکثیر شد. قطعه ژنی مورد نظر در پلاسمیدهای pet28a و pet32a کلون شد. پلاسمیدهای نوترکیب pet28a-plgf-1 و pet32a-plgf-1 به باکتری e.coli rosetta منتقل شدند و بیان پروتئین نوترکیب توسطiptg القاء گردید. بیان پروتئین نوترکیب و محلولیت آن با sds-page بررسی و با روش وسترن بلاتینگ هویت آن تائید شد. یافته ها: مراحل طراحی و ساخت سازه ژنی pet28a-plgf-1 و pet32a-plgf-1 با موفقیت انجام و توالی ژن plgf-1 تأیید گردید. باکتریهای القاء شده با iptg پروتئین plgf-1 را بیان کردند و توسط وسترن بلاتینگ به تایید رسید. همچنین پروتئین نوترکیب plgf-1 تقریبا به صورت نامحلول بیان شد. نتیجه گیری: پروتئین plgf-1 به خوبی در سیستم بیانی rosettae.coliبیان می شود و می توان از این پروتئین نوترکیب در تست-های مختلف استفاده نمود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

کلونینگ و بیان پروتئین فاکتور رشد جفتی-1 انسانی (hPLGF-1) در سیستم بیانی Rosetta E.coli

سابقه و هدف: آنژیوژنزیس یا شکل گیری عروق خونی جدید در شرایط فیزیولوژیک و پاتولوژیک مهم ترین عامل رشد و تکثیر سلول ها است. پروتئین PLGFیا فاکتور رشد جفتی یکی از مهم ترین پروتئین ها در تحریک آنژیوژنزیس است. در این پژوهش، ژن PLGF-1 انسانی از بافت جفت جدا شده و پروتئین مورد نظر در سیستم باکتریایی بیان شد. روش بررسی: دراین مطالعه تجربی، ناحیه کد کننده ژن PLGF-1 از بافت جفت انسان توسط پرایمرهای اخ...

متن کامل

کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب فیوژن tat-nef ویروس hiv-۱ در سیستم بیانی پروکاریوتی

زمینه و هدف: یکی از پروتئین های مهم ویروس hiv-1 به نام nef نقش مهمی در چرخه تکثیر ویروس و پیشرفت بیماری ایدز دارد و القای پاسخ ایمنی بر ضد آن می تواند تا حدی عفونت ویروسی را مهار نماید. به علاوه، بخشی از ناحیه پروتئین فعال کننده رونویسی (tat، اسید آمینه های 48 تا 60) از ویروس hiv توانسته است به عنوان یک پپتید نفوذ کننده سلولی (cpp) عمل نماید. در این تحقیق، برای اولین بار کلونینگ و بیان فیوژن ta...

متن کامل

جداسازی، کلونینگ و بیان FVII نوترکیب انسانی در سیستم بیانی باکولوویروس

زمینه و هدف: فاکتور VII یکی از عوامل انعقادی مهم در مسیر خارجی انعقاد خون است که می تواند با فعال کردن FX نیاز بیماران هموفیل را به فاکتورهای VIII و IX رفع نماید. بیان نو ترکیب این فاکتور مشکلات موجود در تهیه فاکتور های مذکور از پلاسما (با توجه به میزان اندک آن ها) و همچنین خطر انتقال بیماری های خونی را برطرف می سازد. لذا هدف از این پژوهش بیان فاکتور مذکور به صورت نو ترکیب و در سطح بالا با استف...

متن کامل

کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفاb2ی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی

زمینه و هدف: اینترفرون‌ها وسیلة دفاعی بدن علیه ویروس‌ها هستند که به سرعت در بدن تولید شده، سلول­های اطراف را به تولید پروتئین‌هایی که تکثیر ویروس را مهار، یا پاسخ ایمنی و رشد سلولی را کنترل می‌کنند، تحریک می‌کنند. با ‌توجه به اهمیت دارویی اینترفرون آلفا b2 انسانی در ایران و جهان، تولید این دارو در داخل کشور و از طریق بیوشیمیایی امکان‌پذیر اما بسیار مشکل می‌باشد. زیرا تولید این ...

متن کامل

کلونینگ و بیان پروتئین M2 ویروس آنفلوانزا H1N1 در باکتری Ecoli سویه BL21(DE3)

سابقه و هدف: ویروس انفلوانزا A یکی از عوامل اصلی مرگ ومیر سالیانه می باشد و از سال 1960 میلادی بر علیه آن واکسن موثر در دسترس بوده است. تغییرات مداوم آنتی ژنیک ویروس چالش بزرگی در مسیر تولید سالیانه واکسن می باشد. در حال حاضر محققین روی آنتی ژنهای ثابت ویروس مطالعه می کنند. پروتئینM2 یک کانال یونی درون پوشش ویروس انفلوانزای A تشکیل می دهد که در عفونت زایی آن موثر است. این پروتئین حفاظت شده ا...

متن کامل

کلونینگ و بیان پروتئین a استافیلوکوکوس اورئوس در ecoli

استافیلوکوکوس آرئوس یک باکتری کوکسی، گرم مثبت‏، کاتالاز مثبت، اکسیداز منفی، بی‏هوازی اختیاری و کوآگولاز مثبت است. این باکتری جزئی از فلور نرمال پوست و مخاط می‏باشد و بیش از 50 درصد افراد جامعه ناقلین استافیلوکوکوس آرئوس هستند. این باکتری می‏تواند منجر به عفونت‏های متعددی در انسان، نظیر عفونت‏های سطحی پوست همانند آبسه‏، ‏زرد زخم شود. استئومیلیت، آرتریت عفونی و آندوکاردیت نیز موارد دیگر ناشی از ع...

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
فصلنامه علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد پزشکی تهران

جلد ۲۲، شماره ۱، صفحات ۳۲-۳۸

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023